クロストリジウムは高温でも殺菌が困難な食中毒菌であり、クロストリジウム属はチオグリコレート寒天培地中でないと増殖できないとされています。嫌気性菌検出のバリデーションのためには、クロストリジウム試料をチオグリコレート寒天培地に混釈して嫌気設定キットで嫌気にし、MicroBio μ3Dにより35℃培養して菌の検出を確認します。次の検出結果は、BioBall30をチオグリコレート培地で混釈して検出を確認したものです。
※ SCDで混釈して嫌気培養すると、培地内の溶存酸素のため、クロストリジウムは死滅します。
これでは、バリデーションにはなりませんので、ご注意ください。
使用機器: MicroBio μ3D AutoScanne
試供菌株: BioBall30 [Clostridium sporogenes (NCTC 12935 )]
寒天培地: チオグリコレート寒天培地
試料形態: BioBall30を混釈して嫌気設定キットでパッキング
培養条件: 35℃ 42時間培養
試験結果: 36時間で31コロニー検出 (標準のBioBallが1生菌多かったもの)
42時間培養後 影像 マーカー
上記のグラフは検査時にも表示できます。自動検出計数はグラフが示しているように、この例では36時間で検出計数が31個として完了しています。
次のケースは、BioBall30を標準菌株としてSCD寒天培地に混釈してクロストリジウムの検出を確認したものです。
使用機器: MicroBio μ3D AutoScanner
試供菌株: BioBall30 [Clostridium sporogenes (NCTC 12935 )]
寒天培地: SCD寒天培地
試料形態: BioBall30を混釈して嫌気設定キットでパッキング
培養条件: 35℃ 42時間培養
試験結果: 26時間で3コロニー検出(標準のBioBall30の生菌が3生菌に激減)
42時間培養後 影像 マーカー
この結果が示すように、検出計数したコロニーが3個と激減しています。 SCD寒天培地で通常通りに混釈しますと、シャーレを嫌気設定キットでパッキングしても培地中のクロストリジウムが死滅してしまいますので、クロストリジウム標準菌株の試料を「SCD寒天培地で混釈」したものでは嫌気性菌検出のバリデーションができないことになります。