AutoScanner 説明(dpf) ヒストグラムについては p.18 を参照してください.
(2.2.1.1 大腸菌群陰性試験の自動計測(p,12)を参照してください)
大腸菌群は、グラム陰性の無芽胞性の桿菌で,乳糖を分解して酸とガスの両方を生ずる好気性または通性嫌気性の菌と言われています。大部分は腸内細菌ですが,土壌,沿岸海水などに広く分布しており,例えばエロモナス(Aeromonas), シトロバクター(Citrobacter),クレブシエラ(Klebsiella),大腸菌(Escherichia),エンテロバクター(Enterobacter),などが含まれます。この中でも,エロモナスは増殖が遅いと言われています。大腸菌群 陰性 とは,これら全てが陰性である、ということなのです。5 種類混合試料でデソキシコレイト寒天培地によりヒストグラムを取得した結果をもとに,プロトコル時間を設定して,この時間まで培養試験をして何も検出しなければ,大腸菌群陰性としてよいことになります。
全ての大腸菌群の陰性試験を保証するには,検査に採用するデソキシコレイト寒天培地で混合試料を培養して,総合ヒストグラムを取得し,プロトコル時間を設定します。
注意)
公定法のデソキシコレイト寒天培地を使用してください。デソキシコレイト寒天培地の性能も,メーカーによって異なります。培養試験を実施して回収率が,ほぼ100%であることを確認してから,陰性試験(定性試験)に使用してください。
このとき,大腸菌は,日本薬局方に規定されています標準菌株NBRC3972を使用してください。ATCC25922での検出が良くても,NBRC3972の回収率が極端に悪い培地があります。
注意)
大腸菌の検出が速いので,大腸菌だけでプロトコル時間を決めて検出を終了させると,偽陰性になりますので注意してください。
注意)
ポリフェノール(ココア,コーヒー,等)を含んでいる試料は,培地組成の一部になり,菌の増殖を抑制しますので,他の試料と同様のプロトコル時間の設定では,偽陰性になります。陽性試料(positive control)を使用して,プロトコル時間を決めてください。
下記は,牛乳試料中の大腸菌群野生菌㈱の検査をデソキシコレイト寒天培地で実施した例です。
大腸菌群が検出されれば,次のようになりますが,プロトコル時間まで何も検出されなければ,大腸菌群は 陰性 ということになります。
デモ試験できます。(全国どこでも)
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