微生物迅速検出法: タイムラプス影像解析法は,標準の寒天培地培養法(公定法)を全自動化し.マイクロコロニーを迅速に検出しています。コロニーカウントも精確です。

タイムラプス影像解析法(微生物迅速検出法)

タイムラプス影像解析法 (全自動 迅速 微生物検出・計数)

 

 

タイムラプス影像解析法 システム概念図

この技術は、検査開始時点から、寒天培地を培養しながらモニターし、マイクロコロニーが出現してきたら成長を確認して計数し、コロニーカウントグラフを自動的に作成するというものです。30分ごとに培養されている寒天培地シャーレ全体をモニターしていますので、リアルタイムの生菌検出が実現でき、菌検出時には自動的にe-mailや電話連絡をすることができます。寒天培地は、表面塗抹あるいは混釈でもよく、この方法は、従来の培養法そのままで、全自動で迅速に微生物検出とコロニー計数を実施します。
※ PHARM TECH JAPAN (Vol.32 No.14 Dec 2016) に掲載されました「寒天培地培養法の迅速化を可能にしたタイムラプス影像解析法」の論文記事に技術内容が詳しく説明されています。

 

特長

  • 従来の培養法を自動化しているだけです。
  • 使い方がかんたん (寒天培地をセットして、検査を開始するだけです。)
  • コロニー検出は迅速です。 (マイクロコロニーを検出しています。)
  • 表面塗抹も混釈も同様に検査できます。
  • フィルター法 でも同様に迅速微生物検査ができます。
  • 寒天培地の性能は、グラフで厳密に評価できます。
  • 培地のイメージは30分ごとに取得され、磁気媒体に保存されています。
  • コロニーの増殖状況は、検査後あるいは検査中でも、時間を遡って確認検証できます。
  • 食物残渣などの影響がなく、1コロニーレベルの検出計数精度を持っています。
  • 近傍のコロニー同士が重なり合ってもコロニーを正確に計数します。

タイムラプス影像解析法は、当社創業者の小川廣幸(博士(工学))により発明された方法です。(※ ディジタル顕微鏡法として確立されて、その後、方法名が変更されています。) MicroBio μ3D 全自動迅速微生物検出装置は、この迅速検出法により、あらゆる面で従来の寒天培地の培養法を自動化している世界初の迅速検出装置で、現行の規制慣行に適合し、すべての微生物試験アプリケーションに対応していて正確な試験結果を早く得ることができます。

主要ハードウエア

タイムラプス影像解析法を採用した全自動迅速微生物検出装置 MicroBio μ3D は、インキュベータ、トレイ搬送機構、影像取得部から構成されています。表面塗抹や混釈にかかわらず、寒天培地内の全てのコロニーの影像を、培養しながら一定時間間隔で取得して、マイクロコロニーをリアルタイム検出します。

 

インキュベータは、シャーレ5枚セットできるトレイを置くアルミヒータープレート棚の20段から構成されていますので、シャーレ100枚を同時に検査できます。培養は、4温度の異なる温度で培養できます。空気のインキュベータと異なり、温度は正確にPID自動制御されいてほとんど一定ですが、温度幅を例えば設定温度±2℃にしたい場合は、温度サイクル機能で設定し制御できます。
培養温度記録用のロガーが装備されています。

 

マイクロバイオ μ3D AutoScanner  主要ハードウエア

基本性能

コロニーと食物残渣

コロニーと食物残渣の3D画像を比較すると、食物残渣の3D画像は、微生物のものとは異なっており、円形(円錐状)ではなく不規則な形状をしています。

 

微生物コロニーと食物残渣の3D影像

タイムラプス影像解析法と従来法目視カウントの比較

目視検査とタイムラプス影像解析法で検出・計数した結果は通常の場合は同じですが、次のようしにて確認しています。

 

・200〜300コロニーを形成するE.coli菌液1mlをデソキシコレイト寒天培地に混釈し、
 装置で、35℃で培養しながら1時間毎に自動計数した。
・それと同じ計測のタイミングで同一試料のシャーレを倍率5倍の拡大鏡を用いて
 目視カウントした。
・従来法の規定では16時間培養となっているので、計測はこの時間までとし、
 この2方法での計数結果を比較した。

 

タイムラプス影像解析法と目視検査の実験

タイムラプス影像解析法と目視検査の実験結果

論文

この方法について、次のような代表的な論文があります。

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